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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是一種研究細(xì)胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗(yàn)方法。這種類型的實(shí)驗(yàn)允許分析細(xì)胞遷移,并可以用各種藥物和化學(xué)品來增強(qiáng),以闡明特定的機(jī)制。
ibidi 細(xì)胞培養(yǎng)插件與傳統(tǒng)的劃痕檢測方法相比具有許多優(yōu)勢:
1.標(biāo)準(zhǔn)的間隙距離
傳統(tǒng)劃痕分析和使用移液管手動劃痕最大挑戰(zhàn)之一是間隙距離不一致。而且,劃痕往往劃不直。因此,起始距離通常會在幾十到幾百微米之間變化。ibidi 的細(xì)胞培養(yǎng)插件中心會產(chǎn)生500 µm 無細(xì)胞的人造間隙。這確保了間隙是直的,并且每次的距離都是一致的。
2.干凈的遷移功能
手動劃痕還會產(chǎn)生未*去除的自由浮動細(xì)胞的問題。這些自由漂浮的細(xì)胞可以通過延遲自由邊緣的遷移、釋放細(xì)胞內(nèi)內(nèi)容物或重新附著來影響遷移率。ibidi 的細(xì)胞培養(yǎng)插件是可移除的,留下干凈筆直的邊緣。
3.最小化細(xì)胞數(shù)
傳統(tǒng)的劃痕檢測是在多孔板中完成的,需要一層匯合的細(xì)胞。如果實(shí)驗(yàn)有多種條件(藥物治療或基因操作)并且需要多次重復(fù),這會需要增加大量細(xì)胞。對于珍貴或昂貴的細(xì)胞(例如從難以獲得的組織中分離出的原代細(xì)胞),這些實(shí)驗(yàn)可能變得難以進(jìn)行。ibidi 的細(xì)胞培養(yǎng)插件具有較小的生長面積,可最大限度地減少實(shí)驗(yàn)所需的細(xì)胞數(shù)量(準(zhǔn)確地說,每孔0.22 cm 2)。這允許最大限度地利用寶貴的細(xì)胞或增加重復(fù)次數(shù)。
4.蓋玻片底皿
劃痕分析通常在多孔板中進(jìn)行,底部厚,聚苯乙烯,只允許明場成像和間隙距離的量化。ibidi 的細(xì)胞培養(yǎng)插件具有經(jīng)過組織培養(yǎng)處理和滅菌的蓋玻片底部。這允許進(jìn)行明場和免疫熒光成像。就我個人而言,我認(rèn)為這是該產(chǎn)品好的一方面,讓我們能夠看到如細(xì)胞骨架、細(xì)胞粘附形態(tài)、核形態(tài)等結(jié)構(gòu)。此外,多模態(tài)成像功能最終最大限度地提高了單個實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)量,從而節(jié)省了成本和試劑。
5.單個實(shí)驗(yàn)的獨(dú)立插件
“邊緣效應(yīng)"是指一種細(xì)胞培養(yǎng)現(xiàn)象,其中多孔板外周的孔比內(nèi)孔經(jīng)歷更多的蒸發(fā),導(dǎo)致不同的條件和潛在的不一致結(jié)果。使用多孔板進(jìn)行劃痕檢測時可以看到類似的效果,影響結(jié)果的一致性和重現(xiàn)性。ibidi 的細(xì)胞培養(yǎng)插件單獨(dú)包裝,用于單次實(shí)驗(yàn)。這可以防止任何“邊緣效應(yīng)"并確保數(shù)據(jù)一致。另外,培養(yǎng)皿設(shè)計(jì)有蓋子鎖定功能,以確保在處理盤子時蓋子保持打開狀態(tài)。
與槍頭劃痕檢測相比,ibidi 傷口愈合插件可提供更高的重現(xiàn)性
由于細(xì)胞遷移開放區(qū)域隨時間發(fā)生變化。使用 ibidi Culture-Insert 2 孔(左)和用移液器吸頭刮擦產(chǎn)生間隙的對比。數(shù)據(jù)來源:德國弗萊堡大學(xué)的 M. B?rries。