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實驗?zāi)康模?/strong>此次實驗樣品為小鼠肝臟細(xì)胞核,為進一步提高樣品超聲破碎的實驗效率和效果的準(zhǔn)確性,獲得高質(zhì)量的基因組數(shù)據(jù);此次實驗選用凈信科研者的高通量聲波基因組剪切儀設(shè)備對樣品細(xì)胞核進行實驗前處理。
實驗設(shè)備:高通量聲波基因組剪切儀 JXDNA-500PICO
小鼠肝臟細(xì)胞核樣品前處理實驗研磨操作過程:
1.在實驗開始前,需要先將冷水機設(shè)備注滿純水;另外再做實驗之前還需要先打開冷水機設(shè)備,對其進行預(yù)冷處理
2.在打開高通量聲波基因組剪切儀的主機電源后,需要讓水保持循環(huán)狀態(tài),直到達(dá)到4℃之后方可使用
3.在實驗設(shè)備達(dá)到預(yù)定的溫度之后,即可根據(jù)樣品的實驗需求去對設(shè)備的程序參數(shù)進行調(diào)節(jié)設(shè)置
4.把裝有樣品的離心管以對稱的形式放入儀器的適配器內(nèi)
5.對儀器程序的超聲模式需設(shè)為間歇超聲,超聲20s,間歇10s
6.待剪切儀使用完畢后,關(guān)閉冷水機與剪切儀電源,并將適配器擦干后安全放置
實驗操作注意事項:
1.每周至少換一次純水
2.儀器運轉(zhuǎn)時不可用外力強迫適配器旋轉(zhuǎn)馬達(dá)停止
3.超聲水槽內(nèi)必須保證有水才可以啟動超聲,不可無水超聲
4.冷水機的設(shè)定溫度是4℃,后期使用無需再次設(shè)置,打開電源即可
5.超聲波水槽不可用尖銳物品碰觸或刮擦,不可加入高鹽或腐蝕性液體
小鼠肝臟細(xì)胞核樣品前處理實驗超聲打斷結(jié)果:
高通量聲波基因組剪切儀對小鼠肝臟細(xì)胞核樣品的超聲實驗處理效果由上圖可看出,實驗設(shè)備對樣品的前處理實驗超聲打斷結(jié)果良好,可滿足樣品的實驗需求,能夠進一步提高樣品細(xì)胞超聲波破碎的實驗效率和效果的準(zhǔn)確性,能夠獲得高質(zhì)量的基因組數(shù)據(jù)。
高通量超聲波基因組剪切儀采用等溫、非接觸的方式可對樣品進行打斷、勻漿和混合;實驗設(shè)備主要用于細(xì)菌細(xì)胞破碎、蛋白質(zhì)抽提、二代測序樣本DNA片段化、免疫共沉淀等實驗,它具有聲波聚焦,高效率低能耗、實驗重復(fù)性好、得率高等優(yōu)勢;高通量超聲波基因組剪切儀采用4℃低溫水浴超聲波,能量分布均勻,且能夠同時處理30個樣品,被廣泛用于分子生物學(xué)實驗中。